短期大剂量维生素D补充剂治疗Covid的随机试验

由严重急性呼吸综合征相关冠状病毒-2(SARS-CoV-2)引起的2019年冠状病毒(新冠肺炎)已经影响了全球数百万人的生活，并给医学界带来了严重的压力。无症状和无症状的SARS-CoV-2阳性人数远远超过有症状或有严重疾病的人数。1、SARS-CoV-2的传播潜力比以前的SARS-CoV和MERS-CoV疫情更大，因为即使在无症状的SARS-CoV-2RNA阳性个体中也有很高的传播性，因此SARS-CoV-2的传播潜力比以前的SARS-CoV和MERS-CoV疫情更大。3社交距离、个人手部卫生和限制户外接触活动等常规措施已显示出限制冠状病毒感染的好处。但识别SARS-CoV-2感染的无症状携带者对于遏制病毒感染至关重要。2对新冠肺炎进行了抗病毒、抗炎药物和恢复期血浆治疗，但效果参差不齐。4.。

据观察，维生素D缺乏的个体增加了新冠肺炎的患病风险和死亡率。5-7干预研究没有探讨维生素D在SARS-CoV-2感染中的作用，尽管人们知道维生素D的免疫调节作用和对其他病毒感染的保护作用。8一项使用钙化非二醇的干预研究发现，因COVID19住院的患者对重症监护的需求减少了。然而，在这项研究中，维生素D水平在基线和随访期间都无法获得。人们注意到，那些接受维生素D补充剂的人呼吸道感染较少。8然而，维生素D的免疫调节作用很可能在25(OH)D水平上观察到，这被认为高于其骨骼效应所需的水平。10-12。

治疗性维生素D补充剂在无症状的维生素D缺乏和SARS-CoV-2感染患者中的作用尚不清楚。在干预试验10中，来自鼻咽拭子的经PCR确认的SARS-CoV-2感染与相关的临床结果有关，特别是对于没有症状的个体，因为早期的SARS-CoV-2阴性将对限制疾病的传播有显着的公共卫生益处。因此，我们推测，在SARS-CoV-2感染和维生素D缺乏的患者中，大剂量补充胆钙素可能会导致更大比例的SARS-CoV-2阴性，同时炎症的血清标志物也会降低，因此我们推测，在SARS-CoV-2感染和维生素D缺乏的患者中，大剂量胆钙化醇可能导致更大比例的SARS-CoV-2阴性。

连续的SARS-CoV-2感染患者被邀请到印度北部的三级护理医院接受研究，他们有轻微的症状或无症状，或没有共病(高血压、糖尿病、慢性阻塞性呼吸道疾病、慢性肝病、慢性肾脏疾病)。研究中的所有患者都获得了书面同意，方案得到了研究所伦理委员会的批准。

将维生素D缺乏定义为25(OH)D水平和20 ng/ml的患者随机分成两组，每天服用60000 IU胆钙化醇(5毫升纳米液滴形式的口服液)，在“干预组”中治疗7天，目标是达到25(OH)D水平和50 ng/ml，或安慰剂(5毫升蒸馏水)，连续7天(对照组)。不能服用口服补充剂的患者，如需要有创通气的患者，或者有严重并发症(如失控的高血糖或高血压)的患者被排除在外。随后，在第7天对25(OH)D水平进行评估，在干预组中25(OH)D&50 ng/ml的参与者每周补充60000IU的维生素D，或继续每日补充6万IU的维生素D，直到第14天。对照组不补充胆钙素。

定期检测25(OH)D、血钙、血磷、血纤维蛋白原、D-二聚体、铁蛋白、降钙素原、肾功能和肝功能，直至第21天或病毒阴性者(以较早发生者为准)。分别于感染后第5、7、10、14、18、21天取口咽拭子进行SARS-CoV-2RNA检测，采用实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)、CFX-96免疫印迹法(CFX-96 IVD)、Bio-Rad法进行检测。25(OH)D用电化学发光免疫分析(ECLIA)(Roche Cobas E 801 Analyser；Roche Diagnostics)，使用同一制造商提供的试剂盒(Electric sys Total Vitamin D，2.0版)。血清钙(N，8.5~10.2 mg/dl)和C反应蛋白(N，0~5 mg/l)采用罗氏Cobas 8000电化学发光免疫分析法(Roche Cobas 8000，Roche Diagnostics)处理。D二聚体(N，0~240 ng/ml)和纤维蛋白原(N，2~4 ng/l)分别采用美国诊断公司StagoComp/StagoSTAR模型进行分析。

所有参与者都接受了标准的SARS-CoV-2感染和先前并存疾病的护理，按照研究所的方案。主要的结果衡量标准是两组患者在第3周前SARS-CoV-2转阴的比例(每隔24小时确认两次)。其他结果衡量标准是

进行了改良的意向治疗分析。用Kolmogorov-Smirnov检验评价数据的正态性，用均值±标准差(Mean±SD)描述服从正态分布的数据，用偏态数据的中位数和四分位数区间描述数据。用学生t检验比较两组参数变量的均数，用Mann-Whitney U检验比较非参数变量的均数。用Fischer Exact(2乘2尾)检验比较两组患者中SARS-CoV-2RNA阴性率。SPSS版本22用于数据分析，p值<；0.05被认为具有显著性。

89名SARS-CoV-2RNA阳性个体接受了评估。6名需要有创通气的患者，4名既往有并发症的患者和4名25(OH)D>；20 ng/ml的患者被排除在外。35个人拒绝同意；因此，40名参与者随后被随机分配(干预组16人，对照组24人)，如Conort图表所示(图1)。两组纳入研究时的中位数25(OH)D水平和其他参数如表1所示。干预组有10名参与者在干预的第7天可以达到25(OH)D水平50 ng/ml，在第14天又有2名参与者。干预组和对照组第4天的25(OH)D水平分别为51.7(48.9~59.5)ng/ml和15.2(12.7~19.5)ng/ml，P&0.001，中位数分别为42.4(39~48.8)ng/ml和5.1(0~12.3)ng/ml(P<；0.01)(在线补充表1s)。干预组16名参与者中有10名(62.5%)SARS-CoV-2阴性，而对照组24名参与者中有5名(20.8%)(p=0.018)。干预组和对照组的SARS-CoV-2阴转率分别为17.6±6.1d和17.6±6.4d(P=0.283)。

如表2所示，干预组与对照组相比纤维蛋白原显著降低(P<；0.01)。然而，在随访期间，D-二聚体、C反应蛋白、铁蛋白和降钙素原的变化没有观察到组间差异(在线补充表2S-6S)。在研究期间，两组的钙和磷水平没有显著差异(在线补充表7S)。

在这项针对无症状和轻度症状的SARS-CoV-2阳性患者的首次胆钙素干预研究中，我们发现，与缺乏维生素D的患者相比，服用高剂量维生素D补充剂(25(OH)D>；50 ng/ml)的患者获得SARS CoV-2RNA阴性的比例更高。美国疾病控制与预防中心(CDC)和包括ICMR在内的其他监管机构的最新建议并不强制要求在无症状的个人出院前进行重复的SARS CoV-2 RNA检测，以证明SARS CoV-2阴性，因此更大比例的SARS-CoV-2阴性很可能是有益的。

维生素D的免疫调节作用之前已经在细菌和病毒感染中进行了研究，但在SARS-CoV-2感染中还没有。维生素D影响免疫系统中各种基因的表达(先天免疫、获得性免疫)以及下游的炎症级联反应，从而影响细菌和病毒感染的易感性和严重程度。维生素D可诱导中性粒细胞、NK细胞和单核细胞产生抗菌肽长春花素(LL-37)，使单纯疱疹病毒滴度降低。11在最近一项干预试验的荟萃分析中，观察到补充维生素D可以降低急性呼吸道感染的发病率[发病率比0.96(0.92-0.997)，p=0.04]。8同样，在SARS-CoV-2感染中，维生素D缺乏可能导致促炎细胞因子环境，从而加重疾病严重程度。712SARS CoV-2与细胞表面普遍表达的ACE-2(ACE-2)受体结合，进而进入细胞。维生素D可能下调ACE-2的表达，阻止病毒进入细胞。16 17补充维生素D可能会降低感染SARS CoV-2的可能性，或导致病毒早日清除，这似乎是有道理的。值得注意的是，维生素D水平&30 ng/ml与SARS-CoV-2感染严重程度和死亡率的显著降低有关。12因此，我们研究了大剂量维生素D补充剂对SARS CoV-2阳性个体病毒清除可能性的影响。

虽然印度是一个阳光充足的亚热带国家，但维生素D缺乏症很普遍。18然而，关于维生素D补充剂和疾病后果，仍然存在两个问题。首先，25(OH)D的免疫调节作用的适当水平尚不清楚。其次，这些影响可能不会在推注维生素D时观察到，只有在长期维持较高的25(OH)D水平时才会更加明显。因此，我们选择25(OH)D水平的任意下限&50 ng/ml来呈现免疫调节作用，而不是30 ng/ml。

总之，口服大剂量维生素D补充剂以增加25(OH)D>；50 ng/ml有助于在感染SARS-CoV-2的无症状维生素D缺乏的个体中实现更大比例的SARS-CoV-2RNA阴性，同时炎症标志物显著降低。补充胆钙素导致SARS-CoV-2RNA阴性可能有助于降低高传染性SARS-CoV-2感染的传播率。向公共卫生工作者保证，在接受治疗性胆钙化醇补充的个体中，SARS CoV-2RNA阴性的可能性更大，这将是令人鼓舞的。

大剂量维生素D能否超标准治疗减少重症新冠肺炎病患者的ICU/住院天数和死亡率？

维生素D具有免疫调节作用，可能会降低病毒感染的易感性和严重程度，但其在SARS-CoV-2感染中的作用尚不清楚。

每天补充60,000 IU的胆钙素有助于75%的参与者在第14天达到25(OH)D>；50 ng/ml。

治疗性的大剂量胆钙化醇补充剂导致另外41.7%的参与者SARS-CoV-2RNA阴性(p<；0.001)，并有助于清除病毒SARS-CoV-2RNA。